Меню

8 800 200-75-15
+7 495 640-17-71

Поиск

FAQ

Какие пробирки необходимы для выделения ДНК/РНК

Пробирки микроцентрифужные (типа «Эппендорф») объемом 1,5 мл с плоскими крышками (желательно с замком)

Какие способы детекции можно реализовать с помощью оборудования «ДНК-Технология»

  • ПЦР с детекцией результатов в формате электрофорез: Терцик + Эльф - качественный анализ

  • ПЦР с детекцией результатов по конечной точке (в формате ФЛЭШ): Терцик + Джинкачественный анализ

  • ПЦР с детекцией результатов в реальном времени: амплификаторы ДТпрайм/ДТлайт – качественный и количественный анализ

Какие термостаты и в каком количестве должны быть в ПЦР-лаборатории

Необходимо:

  • Твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 – 100 0С – 2 шт.

  • Компания «ДНК-Технология» предлагает две позиции:

  1. Твердотельный термостат (программируемый) «Гном» с прижимной крышкой, 40х1,5 мл и 28х0.5 мл (ДНК-Технология, Россия)

  1. Твердотельный термостат «Термит» 40х1,5 мл, 28х0.5мл (ДНК-Технология, Россия)

(см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Главная страница. Прайс»)

  • Количество термостатов определяется Методическим указаниям от 2009 г (МУ 1.3.2569-09), регламентирующим разделение ПЦР-лаборатории на Рабочие зоны:

Зона 1 - прием, маркировка, регистрация, первичная подготовка материала; обеззараживание и хранение проб:

- Твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 – 100 0С -1 шт.

Зона 2 - выделение и очистка нуклеиновых кислот:

- Твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 – 100 0С – 1 шт.

Полный перечень оборудования и расходных материалов, рекомендуемый для функционирования ПЦР-лаборатории, представлен в Методических указаниях 2009 г (МУ 1.3.2569-09) (см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Информация. Нормативная документация»)

Какие типы анализа можно реализовать с помощью ПО «ДНК-Технология»

  • Качественный анализ - позволяет определить наличие или отсутствие в образце искомого фрагмента ДНК

  • Количественный со стандартами

  • Анализ полиморфизмов, плавление (для генотипирования человека)

  • Мультиплексный анализ (TNC-комплекс, ГерпесКомплекс, UMC-комплекс)

  • Биоценоз (количественный анализ состояния биоценоза урогенитального тракта у женщин Фемофлор, Андрофлор у мужчин)

  • НРV (для обнаружения, типирования и количественного анализа вирусов папилломы человека: наборы реагентов Квант)

  • ГМИ (для обнаружения геномодифицированных источников,

определения их количества (согласно стандартам, действующим на территории РФ: 0,1%, 1%, 5%)

  • HLA DR, HLA DQ (для анализа HLA)

  • AZF (анализ факторов мужского бесплодия – фактора азооспермии)

  • RHD, Gender (Пренатальная диагностика)

  • Относительный - позволяет оценить количество искомого фрагмента ДНК в исследуемых образцах относительно «базовой» пробирки

  • Анализ полиморфизмов, 2 краски - анализ генетических полиморфизмов, например, SNP, с использованием двух различных флуорофоров в одной пробирке

Какие холодильники и в каком количестве должны быть в ПЦР-лаборатории

Необходимо:

Комбинированный холодильник с камерами, поддерживаю-щими температуру от +2 до +8 0С и не выше -16 0С - 3 шт.

  • Количество холодильников определяется Методическим указаниям от 2009 г (МУ 1.3.2569-09), регламентирующими разделение ПЦР-лаборатории на Рабочие зоны:

Зона 1 - прием, маркировка, регистрация, первичная подготовка материала; обеззараживание и хранение проб:

- Холодильник для хранения исследуемого материала -1 шт.

- при необходимости: морозильная камера на -70 0С (для длительного хранения материала).

Зона 2 - выделение и очистка нуклеиновых кислот:

- Холодильник для хранения наборов для выделения нуклеиновых кислот – 1 шт.

- Холодильник для хранения препаратов нуклеиновых кислот - 1 шт.

- Не допускается хранение препаратов нуклеиновых кислот в одном холодильнике с компонентами набора для выделения нуклеиновых кислот

Зона 3 - приготовление реакционных смесей, проведение обратной транскрипции, амплификации нуклеиновых кислот и учет результатов ПЦР FLASH и «в реальном времени»:

- Холодильник для хранения наборов для проведения обратной транскрипции и амплификации нуклеиновых кислот – 1 шт.

  • Допустимо объединение зоны 2 и зоны

  • Полный перечень оборудования и расходных материалов, рекомендуемый для функционирования ПЦР-лаборатории, представлен в Методических указаниях 2009 г (МУ 1.3.2569-09) (см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Информация. Нормативная документация»)

 

Какие центрифуги и в каком количестве должны быть в ПЦР-лаборатории

Необходимо:

  • Центрифуга для пробирок объемом 5 - 100 мл до 3000 об/мин. – 1 шт.

  • Настольная центрифуга для микропробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 -2 мл до 10000g – 2 шт.

  • Микроцентрифуга/вортекс – 2 шт.

  • Компания «ДНК-Технология» предлагает два типа центрифуг:

  1. Настольные высокоскоростные центрифуги для микро-пробирок:

  • Центрифуга лабораторная IEC MicroCL 24 места (Thermo Electron LED GmbH, Германия)

  • Центрифуга «Mini Spin», 12 мест, 13400 об/мин (Eppendorf, Германия)

  • Центрифуга «Mini Spin plus», 12 мест, 14500 об/мин (Eppendorf, Германия)

  • Центрифуга для пробирок объёмом 4,5 мл, с RCF не ниже

1150 g, например, центрифуга ЕВА 20 Hettich (3461g или 6000 об/мин);

(17000 g или 13300 об/мин) (для систем Пол-плода и Резус-фактор плода)

  1. Вортекс:

  • Центрифуга СМ-70M-07

(см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Главная страница. Прайс»)

  • Количество центрифуг определяется Методическими указаниями от 2009 г. (МУ 1.3.2569-09), регламентирующими разделение ПЦР-лаборатории на Рабочие зоны:

Зона 1 - прием, маркировка, регистрация, первичная подготовка материала; обеззараживание и хранение проб:

- Центрифуга для пробирок объемом 5 - 100 мл до 3000 об/мин. - 1шт.

- Микроцентрифуга/вортекс – 1 шт.

- Настольная центрифуга для микропробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 -2 мл до 10000g – 1шт.

Зона 2 - выделение и очистка нуклеиновых кислот:

- Микроцентрифуга/вортекс – 1 шт.

- Настольная центрифуга для микропробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 -2 мл до 10000g -1 шт.

Зона 3 - приготовление реакционных смесей, проведение обратной транскрипции, амплификации нуклеиновых кислот и учет результатов ПЦР FLASH и «в реальном времени»:

- Микроцентрифуга/вортекс – 1 шт.

  • Полный перечень оборудования и расходных материалов, рекомендуемый для функционирования ПЦР-лаборатории, представлен в Методических указаниях 2009 г (МУ 1.3.2569-09) (см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Информация. Нормативная документация»)

 

Каковы правила взятия материала

Кровь

  • Берется в пробирки (вакутейнеры) с сиреневой или голубой крышками, содержащими в качестве антикоагулянта ЭДТА (сиреневые крышки) или цитрат натрия (голубая крышка).

  • НЕ допускается использование гепарина в качестве антикоагулянта

Плазма

  • Получается при цетрифугировании крови при 3000 об/мин. в течение 20 мин. при комнатной температуре.

Соскобы урогенитального тракта

  • Берутся универсальными зондами или цитощеткой (не допускается у беременных) в пластиковые пробирки объемом 1,5 мл с:

- реактивом «ПРОБА-РАПИД»;

- физраствором (0,5 мл).

  • Рекомендуется предварительно удалить слизь и свободное отделяемое.

  • НЕ рекомендуется накануне обследования женщинам проводить туалет половых губ и спринцевание.

  • Брать материал ДО проведения мануального исследования

  • Зеркало для получения материала из влагалища НЕ обрабатывать антисептиками.

  • При взятии материала из уретры воздержаться от мочеиспускания в течение -1,5-2 часов.

 Ликвор, мокрота, слюна, околоплодные воды, сперма, секрет предстательной железы

  • Берутся в объеме 0,5- 1 мл в стерильные контейнеры.

Смывы из рото- и носоглотки

  • Берутся с использованием стерильного физраствора (3-5 мл - для носоглотки, 8-10 мл – для ротоглотки).

  • В последнем случае рекомендуется предварительное полоскание в теч.10-15 сек.

  • Промывную жидкость собирают через воронку в стерильные контейнеры/пробирки.

Мазок из ротоглотки и полости носа, миндалин, фибриновых пленок

  • Берется сухим стерильным одноразовым зондом в пластиковые пробирки пробирки объемом 1,5 мл с:

- реактивом «ПРОБА-РАПИД»;

- физраствором (0,5 мл).

 Моча

  • Берется первая порция утренней мочи в объеме 50 мл в стерильные контейнеры.

 Лимфоциты/мононуклеары

  • Берутся из 0,5 мл периферической крови с помощью комплекта реагентов для выделения лимфоцитов (Фиколл-урографин) производства ООО «НПО ДНК-Технология», согласно прилагающийся инструкции.

Каковы правила хранения выделенного материала

  • Препараты РНК НЕ подлежат хранению

  • Препараты ДНК/кДНК хранятся при температуре:

+2- 8 ̊ С не более 7 суток

-20 ̊ С не более 6 месяцев

-70 ̊ С не более 1 года

Каковы правила хранения материала

Кровь

  • Время от взятия материала до получения плазмы – не более 6 часов

  • Транспортировка и хранение крови до получения плазмы +2- 8 ̊ С

  • Замораживать цельную кровь допустимо только в случае необходимости длительного хранения и для дальнейшего использования для определения генетических полиморфизмов. Повторное замораживание НЕ допускается.

Плазма

  • Допустимо хранить:

- при +2- 8 ̊ С не более 1 суток;

- при - 20 ̊ С не более 3 месяцев.

  • Допускается однократное размораживание.

  • Повторное замораживание НЕ допускается

Соскобы урогенитального тракта

  • Транспортировка и хранение соскоба при +2- 8 ̊ С не более 24 часов

Ликвор, мокрота, слюна, околоплодные воды, сперма, секрет предстательной железы

  • Транспортировка и хранение материала при +2- 8 ̊ С не более 24 часов

 Смывы из рото- и носоглотки

  • Транспортировка и хранение соскоба при +2- 8 ̊ С не более 24 часов

 Мазок из ротоглотки и полости носа, миндалин, фибриновых пленок

  • Транспортировка и хранение соскоба при +2- 8 ̊ С не более 24 часов

Моча

  • Транспортировка и хранение при +2- 8 ̊ С не более 24 часов

  • После хранения рекомендуется выдержать мочу при комнатной температуре (18-25 ̊С) в течение 1 часа, затем перемешать пипетированием

Лимфоциты/мононуклеары

  • при +2- 8 ̊ С не более 1 суток

  • при - 20 ̊ С не более 1 месяца.

Каковы форматы комплектации наборов реагентов производства «ДНК-Технология»

  • Наборы раскапаны в пробирки под парафин (все, кроме комплектов реагентов для определения генетических полиморфизмов методом ПЦР в режиме реального времени).

  • Раскапанные наборы:

- стрипованные (8 штук по 0,2 мл) – формат Rt;

- единичные по 0,5 мл - форматы форез/FLASH «Джин»;

- единичные по 0,2 мл – формат FLASH «Джин» и Rt.

  • При заказе наборов c детекцией FLASH и Rt необходимо указать формат пробирок (единичные или стрипованные)

Более подробную информацию можно узнать на сайте

www.dna-technology.ru (раздел Продукция. Комплекты реагентов) и по телефону Службы клиентской поддержки +7 (800) 200-75-15

Какое число каналов флуоресценции в амплификаторах детектирующих ДТ

  • 4 канала флуоресценции (по умолчанию) для ДТпрайм, ДТлайт

  • 5 каналов флуоресценции (по запросу) для ДТпрайм, ДТлайт

Критерии результатов (положительного/отрицательного/недостоверного)

  • «+»в образце присутствуют фрагменты искомой ДНК (зарегистрирован экспоненциальный рост сигнала для Специфики и зарегистрирован/НЕ зарегистрирован рост сигнала для ВК).

Специфика в стандартных программах (кроме генотипирования - Анализ полиморфизмов, плавление) для наборов «ДНК-Технология» - определяется по каналу Fam.

Внутренний контроль (ВК) в стандартных программах (кроме генотипирования - Анализ полиморфизмов, плавление) для наборов «ДНК-Технология» - определяется по каналу Hex.

Таким образом, положительный результат - это:

Fam + /Hex+ , или Fam + /Hex-

  • «-»в образце отсутствуют фрагменты искомой ДНК (отсутствует экспоненциальный рост сигнала для Специфики, в случае использования внутреннего контрольного образца (ВК) – зарегистрирован экспоненциальный рост сигнала для ВК).

Таким образом, отрицательный результат - это: Fam - /Hex+

  • «нд»недостоверный результат (при использовании ВК - отсутствует экспоненциальный рост сигнала, как для Специфики, так и для ВК).

Таким образом, недостоверный результат - это: Fam - /Hex-

См. инструкцию к прибору (на сайте www.dna-technology.ru, раздел Инструкции. Оборудование. ДТпрайм); инструкции к наборам и по телефону Службы клиентской поддержки

+7 (800) 200-75-15

 

Страницы